据开放获取期刊《基因组医学》16日悍然的一项钻研,美国科学家呈文了一种建立癌症小鼠模型的新方法——利用有“基因魔剪”之称的CRISPR/Cas9琐细快捷将癌症相关基因敲入小鼠的DNA中。该方法以铺天盖地的高效,满足了神速粗略成立植物模子的重要。
研讨通信作者、麻省大学医学院RNA疗法研究所的王文说:“现无效来敲入致癌基因以竖立癌症模型的方法要末违拗很低,要末难以控制敲入位置和敲入的拷贝数。CRISPR/Cas9使得在目标基因座插入大片段DNA成为可能,而且可使用于执行室的人类细胞以及小鼠中。咱们研收回了一个新的琐屑——CRISPR-SONIC,可以在肝癌小鼠模型中灵动进行基因敲入,且精确率很高。”
CRISPR/Cas9细碎由一段领导RNA和Cas9酶构成。为了将致癌基因插入活小鼠的基因组,团队使用了具备2个向导RNA的CRISPR/Cas9,进行了一个三举措的操作。起首,此中一个带领RNA和Cas9酶一块儿对指标DNA身分进行切割;第二步,另外一个向导RNA和Cas9会对一个DNA环(即质粒供体)进行切割;第三步则是将曾经被切割成线状的质粒环插入目标身分。
该门径在试验室细胞中失掉获胜考验,也在小鼠身上实现为了测试。团队视察到在使用了CRISPR-SONIC后,样本中约有10%的肝脏细胞得胜带上了绿色荧光卵白(GFP)。这相关于之前那些办法大要0.5%的敲入听从来说,是一个庞大的升职。
该武艺亦可用于竖立生物发光癌症模子,让钻研者们及时监测癌细胞的生长与癌症发展。